支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体。大小一般在0.3-0.5um之间，缺乏细胞壁呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖，在自然界分布极为广泛。可对人、动物、植物、昆虫等致病，造成极大危害。

支原体的种类有：Mycoplasma arginin（精氨酸支原体）、Mycoplasma hyosynoviae（猪滑液支原体）、Mycoplasma gateae（猫支原体）、Mycoplasma orale（口腔支原体）、Mycoplasma salivarium（唾液支原体）、Mycoplasma auris（耳支原体）、Mycoplasma cloacale（泄殖腔支原体）、Mycoplasma alkalescens（产碱支原体）、Mycoplasma spermatophilum（嗜精支原体）、Mycoplasma fermentans（发酵支原体）、Mycoplasma hyopneumoniae（猪肺炎支原体）、Mycoplasma edwardii（爱德华氏支原体）、Mycoplasma primatum（类人猿支原体）、Mycoplasma opalescens（乳白色支原体）、Mycoplasma pulmonis（肺支原体）、Mycoplasma collis（希尔氏支原体）、Mycoplasma mobile（运动支原体）等。

支原体对细胞的影响，主要从两方面考虑：一方面是对细胞的直接影响，细胞被支原体污染后，增殖缓慢，部分细胞变圆，从瓶壁上脱落，部分细胞虽然表面变化不十分明显，实际上潜伏着多方面的危险；另一方面，支原体可以通过消耗培养基中的精氨酸，抑制细胞DNA、RNA的合成，降低细胞的抵抗力。总之，支原体感染会对细胞造成的影响是多方面的：包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、酶的作用途径、细胞膜的组成、染色体结构、转染效率、以及细胞存活等多方面的改变。

Lonza发光法—MycoAlert支原体检测试剂盒 

美国Lonza MycoAlert支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性，进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作，能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解，然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应，将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一个比率，该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在，第二次读数相对于第一次读数就没有增加；如果酶与底物进行特异性反应，就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到，其公式如下：

Luciferase ATP + Luciferin + O2 —> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT

这个反应的发生是在室温(18°C～22°C)进行的，也是荧光素酶反应的最佳温度。

在支原体检测试剂盒的检测原理中，最后通过分光光度计读数，由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系，因此可检测支原体的污染问题。

Lonza支原体检测试剂盒特点：

1．快速--20分钟就可以得到结果。

2．通用—可检测所有的支原体或者无胆甾原体。

3．高敏感度--可检测极少量的支原体。

4．简易--仅混合2种试剂和您的样品，将2种读数放到照度计上就可以得到确切结果。

5．完整--试剂盒包括检测用所需要的全部试剂。

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新一代MycoAlert Plus 支原体检测试剂盒：

与第一代MycoAlert支原体检测试剂盒相比有更高的灵敏度和准确性。

适合检测样品：

悬浮细胞上清液

未启用的培养基

10%-20%FCS or FBS

L-谷氨酰胺

青霉素-链霉素混合物

中性胰蛋白酶（1:2稀释）

庆大霉素/两性霉素B

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MycoZap™支原体去除试剂盒（MycoZap™ Mycoplasma Elimination Kit）

   特征：

简单--只需要简单的将试剂加入到您的培养基中 
通用--MycoZap®试剂可用来去除细胞培养中柔膜体纲的污染，包括支原体、无胆甾原体、

植物花螺原体和虫原体 
彻底--抗生素和反新陈代谢试剂的结合保证了污染去除的彻底性 
完全--包含所需要的全部试剂 
在支原体污染去除之后4-6周内可以用MycoAlert支原体检测试剂盒来进行不间断的检测以保证接下来的培养物不被污染。

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北京毕特博生物技术有限责任公司

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