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无血清培养法初步富集人结肠癌Caco-2干细胞的研究

作者:中南大学湘雅医院 来源:2012CCDD 发布时间: 2014-07-18 10:38  浏览次数:
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目的 通过无血清培养法初步富集人结肠癌Caco-2干细胞,并探讨其可行性,以期为Caco-2干细胞的有效分选方法提供一种思路,为结肠癌的研究构建一种新的干细胞模型。耐药性,行免疫荧光染色检测结肠癌干细胞特异性标记物CD133的表达。肿瘤干细胞球,并能连续传代,将其重悬于含血清培养基后,能分化成贴壁的单层细胞;Caco-2肿瘤干细胞球可在含血清培养基和无血清培养基的交替培养中发生相应转化;耐药实验显示一部分Caco-2肿瘤干细胞球来源的单细胞能在添加了化疗药物的无血清培养基中存活并重新增殖成球,无药物干预组、5-氟尿嘧啶干预组、奥沙利铂干预组、5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂干预组形成的Caco-2肿瘤干细胞球的数目分别为:(10.0±1.15)个/孔、(16.1±1.52)个/孔、(17.5±1.43)个/孔、(18.8±1.14)个/孔,4组的成球数都存在统计学差异(P< 0.05):5-氟尿嘧啶联合奥沙利铂干预组>奥沙利铂干预组>5-氟尿嘧啶干预组>无药物干预组;免疫荧光染色显示Caco-2肿瘤干细胞球呈现橙红色荧光,即为CD133阳性表达。

  方法 将人结肠癌Caco-2细胞接种于无血清培养基中以初步富集Caco-2干细胞,观察其生长增殖过程,通过含血清培养基和无血清培养基交替培养诱导其分化,利用5-氟尿嘧啶、奥沙利铂验证其

  结果 一部分Caco-2细胞在无血清培养基中逐渐增殖形成悬浮的

  结论 人结肠癌Caco-2细胞可以在无血清培养基中形成悬浮的肿瘤干细胞球,它具有自我更新、不断增殖、分化和耐药的能力,能表达结肠癌干细胞特异性标记物CD133;无血清培养联合化疗药物干预比单纯采用无血清培养有利于Caco-2干细胞的富集,奥沙利铂的富集效率高于5-氟尿嘧啶,二者联用的富集效率高于单药;通过无血清培养法可以初步富集到人结肠癌Caco-2干细胞的样细胞。

  (摘自2012中国消化系疾病学术大会论文集)

 

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