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| 细胞培养在科研领域里面算是成本费用比较高的其中一项，很多客户问我们厂家为什么我们把细胞产品发货到他们手上的时候细胞长势以及传代能力很好，客户自己培养一段时间后细胞长势不行甚至死亡?在此恒远小编告诉您细胞培养不容马虎大意，正确的细胞培养无菌操作如下： 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株的操作。 2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面的中央无菌区域，勿在边缘的非无菌区域操作。 3. 小心取用无菌的实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口，亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 4. 工作人员应注意自身的安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染的细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 的产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头的伤害等。 5. 定期检测下列项目： (1). CO2 钢瓶的CO2 压力 (2). CO2 培养箱的CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 (3). 无菌操作台内的airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。 LONZA细胞培养相关-产品目录 http://www.bitebo.com/a/gb2312/product/lonza/xbpy/2010/0928/3758.html |
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