细胞培养，让康宁KBM581培养基带你飞

作者：admin 来源：本站发布时间： 2017-01-06 18:35　浏览次数：

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很多细胞治疗领域的小伙伴提起康宁KBM581培养基并不陌生。在CIK培养过程中，581以高细胞扩增倍数、突出的细胞表型和出色的杀伤活力在众多无血清培养基中脱颖而出。甚至在NK的培养过程中，581也表现优异，不仅可以促进细胞因子和抗体活化的NK细胞高效扩增，对于饲养层细胞支持的NK细胞培养也效果显著。小编今天要跟大家分享的是，581还能支持T细胞，尤其是如今在细胞治疗领域大热的CAR-T细胞培养，即使在完全无血清条件下，足够的CAR-T细胞数量可以满足，其表型也能支持目前临床试验的需求。

以下的数据来源于国内知名CAR-T细胞治疗企业的临床试验。

研究人员首先对比了包括KBM581在内的不同品牌的5种无血清培养基在化疗病人血液样本制备CAR-T细胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化疗，分离到PBMC后，用T细胞分选试剂盒进行T细胞分选，然后用CD3/CD28磁珠活化，同时加入IL-2进行细胞培养；培养第3天，用连接有CD19-CAR基因的慢病毒载体转导细胞，继续培养到第14天。与其它商品化的淋巴细胞培养基相比，581和另一品牌产品Competitor1（Competitor1和Competitor2都被认为是最经典的淋巴细胞培养基）获得了最高的扩增效率（8倍，Figure1a）。细胞表型检测结果显示581和Competitor1的T细胞纯度、CTL比例都符合该实验室要求。CD8+的CTL比例都超过80%，提示较高的杀伤活性。

figure 1a

figure 1b

Figure1 不同品牌培养基培养CAR-T细胞扩增倍数和细胞表型比较

随后研究人员比较了581与Competitor1在普通未接受放、化疗B-ALL病人样本中，CAR-T细胞的扩增情况。用同样的分离、刺激和培养方法扩增11天，581体系中CAR-T细胞扩增42.8倍，高于Competitor1的40.5倍，生长曲线显示581具有推迟的对数生长期和更高的扩增潜能（Figure2，由于回输的需要，细胞未继续扩增）。在其他B-ALL病人和健康人样本中，研究人员也获得了相似的结果。

figure 2

另一个国内著名CAR-T细胞研发企业对581和Competitor2 的对比实验发现，581与Competitor2培养的CAR-T细胞扩增倍数、细胞活率及表型（CD3/CD4/CD8亚群比例,Tn/Tcm/Tem亚群比例，PD-1+细胞比例等）方面没有显著差异，二者都可以支持T细胞尤其是CAR-T细胞的高效扩增。