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细胞培养,让康宁KBM581培养基带你飞

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2017-01-06 18:35  浏览次数:
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很多细胞治疗领域的小伙伴提起康宁KBM581培养基并不陌生。在CIK培养过程中,581以高细胞扩增倍数、突出的细胞表型和出色的杀伤活力在众多无血清培养基中脱颖而出。甚至在NK的培养过程中,581也表现优异,不仅可以促进细胞因子和抗体活化的NK细胞高效扩增,对于饲养层细胞支持的NK细胞培养也效果显著。小编今天要跟大家分享的是,581还能支持T细胞,尤其是如今在细胞治疗领域大热的CAR-T细胞培养,即使在完全无血清条件下,足够的CAR-T细胞数量可以满足,其表型也能支持目前临床试验的需求。


以下的数据来源于国内知名CAR-T细胞治疗企业的临床试验。


研究人员首先对比了包括KBM581在内的不同品牌的5种无血清培养基在化疗病人血液样本制备CAR-T细胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化疗,分离到PBMC后,用T细胞分选试剂盒进行T细胞分选,然后用CD3/CD28磁珠活化,同时加入IL-2进行细胞培养;培养第3天,用连接有CD19-CAR基因的慢病毒载体转导细胞,继续培养到第14天。与其它商品化的淋巴细胞培养基相比,581和另一品牌产品Competitor1Competitor1Competitor2都被认为是最经典的淋巴细胞培养基)获得了最高的扩增效率(8倍,Figure1a)。细胞表型检测结果显示581Competitor1T细胞纯度、CTL比例都符合该实验室要求。CD8+CTL比例都超过80%,提示较高的杀伤活性。



figure 1a

 


figure 1b

Figure1 不同品牌培养基培养CAR-T细胞扩增倍数和细胞表型比较


随后研究人员比较了581Competitor1在普通未接受放、化疗B-ALL病人样本中,CAR-T细胞的扩增情况。用同样的分离、刺激和培养方法扩增11天,581体系中CAR-T细胞扩增42.8倍,高于Competitor140.5倍,生长曲线显示581具有推迟的对数生长期和更高的扩增潜能(Figure2,由于回输的需要,细胞未继续扩增)。在其他B-ALL病人和健康人样本中,研究人员也获得了相似的结果。

 

figure 2


 

另一个国内著名CAR-T细胞研发企业对581Competitor2 的对比实验发现,581Competitor2培养的CAR-T细胞扩增倍数、细胞活率及表型(CD3/CD4/CD8亚群比例,Tn/Tcm/Tem亚群比例,PD-1+细胞比例等)方面没有显著差异,二者都可以支持T细胞尤其是CAR-T细胞的高效扩增。


综上,581作为一种营养丰富的无血清培养基,不仅适合CIKNK细胞的培养,也适用于T细胞,尤其是CAR-T细胞的扩增,是目前细胞治疗临床试验和研究的最优选择。


 

 

 

 

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88-581-CM

康宁KBM581培养基

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