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什么事表面抗金标法--HBsAg?

作者: 来源: 发布时间: 2009-12-04 11:19  浏览次数:
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乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗—HBs)HBsAg存在于病毒颗粒的外壳以及小球形颗粒和管状颗粒。于感染后2-12周,丙氨酸转氨酶(ALT)升高前,即可由血内测到,一般持续4~12周,至恢复期消失,但感染持续者可长期存在。HBsAg无感染性而有抗原性,能刺激机体产生抗- HBs。在HBsAg自血中消失后不久或数星期或数月,可自血中测到抗—HBs,抗HBs出现后其滴度逐渐上升,并可持续存在多年。抗-HBs对同型感染具有保护作用。近期感染者所产生的抗-HBs属IgM,而长期存在血中的为抗-HBsIgG。HBsAg有“a”、“b”、“y”、“r”、“w”等多种抗原决定簇,其中“a”是共同的抗原决定簇,“d”、“y”和“r”、“w”为主要的亚型决定簇。

  HBsAg有8种亚型和2种混合亚型,以adr,adw,ayr,及ayw为主的4种亚型。各亚型的地理分布不同,adr亚型主要分布在亚洲及太平洋地区,adw亚型主要见于北欧,美洲及澳洲,ayw亚型主要在非洲,中东和印度,ayr亚型罕见。在我国的主要是adr亚型,但广西的东北部则主要为adw亚型,西藏,新疆及内蒙则有ayw亚型为主。亚型的测定对流行病学调查,预防研究有一定意义。

金标纸条采用双抗原夹心法免疫测定原理,选择经纯化的基因工程制备的gp36、gp41、p24抗原作为包被抗原和gp41、gp36基因工程抗原和 p24合成肽作为胶体金结合抗原。当待检标本中含有HIV抗体时,先和金标记抗原结合,由于层析作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动,当遇到包被抗原时,形成Ag-Ab-Ag-Au复合物而富集在包被线上,形成红色沉淀线。同时在包被膜上还有一条质控线对照,故当有两条红线时判为阳性,只有一条红线时,判为阴性。
   elisa也是采用双抗原夹心法免疫测定原理,抗原包被于固相表面上,血清中如存在抗体则特异与之结合,再经过酶(抗抗体)、显色剂等级连放大作用(每步之间要洗的!)根据co值判断结果。
   从试验原理基本是一致的,具体方式金标识以层析推进反应的进程,elisa是直接加入反应再清洗。如果每个步骤均得到严格控制的话,elisa更可靠一点,如果有凝血或洗板不干净,恐怕还不如金标。
   一般elisa,如阳金标在作一下。金标亦阳,elisa第二遍就省了,直接送确诊试验室。如金标阴,或是elisa弱阳(od<2*co)elisa再复查。

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