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1.Clonetics原代细胞及培养基系统 （点击标题进入） 2.Lonza Clonetics原代细胞培养基 （点击标题进入）
CloneticsTM 培养基系统（CloneticsTM Media Systems）
培养基说明
CloneticsTM培养基系统是为了使某些特定的正常人体细胞获得最佳的生长状态而合成的。可以购买不含添加剂的基础培养基，也可购买完全培养基，或者便于使用者控制添加剂的种类和浓度的BulleKits方便包装。每种培养基均检测了其维持正常人体细胞生长的的能力。每批培养基均经过生化和无菌检测。
基础培养基
基础培养基配方已经经过优化使之适合于某些特定类型的正常人体细胞的培养，不含细胞增殖所必需生长因子。因此必需添加生长因子以加强细胞的接种效率和促进细胞的增殖。
完全培养基
完全培养基是含各种添加剂的生长培养基（BPE和BBE分别各自包装），含有特定类型正常人体细胞增殖所必须的各种生长因子和添加剂。尽量避免加入成分不确定的添加剂，即便必需也仅使用最小量。所有生长培养基的标准配方都包括抗生素，特殊要求情况下也提供不含抗生素的培养基。
BulletKits
BulletKits提供灵活的终培养基配方及更长的保存期。每个BulletKit含有基础培养基，已预先测定的专一用途的aliquots(SingleQuots)生长因子和抗生素，便于您根据自己的选择配置生长培养基。
培养基的制备（Media Preparation）---在无菌环境中执行下列操作。
配制一瓶含各种添加剂的培养基，操作如下：
1， 加BBE或BPE (如需要) 于500ml的基础培养基瓶中
A,从培养基中分离BBE或BPE添加剂。
B,用乙醇或异丙醇擦净小瓶和培养基瓶。
C,用吸管将瓶中所有的内容物 (大约2ml) 加入培养基中。用培养基冲洗盛装BBE的小瓶再将洗液移回500ml瓶中。
D,盖上盖子，轻轻地旋转培养基几次使之混合。
E,在培养基标签上标记好BBE或BPE的加入日期。
BulletKits,遵循以下步骤：
1, 用乙醇或异丙醇擦净SingleQuots 冷冻小瓶和基础培养基瓶外表面。
2, 无菌条件下打开冷冻小瓶，用吸管将冷冻小瓶中全部内含物加入基础培养基中。
3, 用培养基清晰每个冷冻小瓶，再将洗液倒回基础培养基瓶中。要完全达到标示的体积是不太可能的，少量的丢失，即使达到10%通常不会影响含添加剂培养基的细胞生长特性。
4, 我们建议您将试剂盒提供的标签贴到已加油添加剂的原基础培养基瓶上，并覆盖原基础培养基瓶的标签，用它来记录加入的每种添加剂的数量及日期，这样可避免混淆和可能得双倍添加。
5, 根据贮藏期限在标签上注明有效期。完全重新配制的BulletKits 有效期为30天。这种含添加剂的培养基即可以当作一种生长培养基。
注意：考虑到在补充添加剂的过程中可能导致污染，为了确保无菌，整个新配制的生长培养基可能需要使用0.2微米的滤膜重新过滤。由于每次滤过可能导致某些蛋白的丢失，因此我们并不推荐定期的重新滤过。
开始之前---在准备培养基和细胞以前，请遵循以下步骤：
1, 准备一个无菌场地
无菌场地内备有一个带前置存放开口和滤过层流 级生物安全柜或一个等同的装置。
2, 决定所需的培养基量
请参阅“常规塑料器皿生长面积表”以此来决定所需的培养基量。
3, 所需的无菌器械和器皿
Ø 无菌可处理的血清学吸液管
Ø 微量移液器和无菌Tips
Ø 可调多通道移液器或重复使用的移液器
Ø 与多通道移液器配合使用的无菌容器
Ø 15ml无菌离心管
Ø 细胞培养瓶
Ø 多孔、平底组织培养板
Ø 血细胞计数仪货细胞计数器
4, 其他所需物品：
Ø 70%酒精（乙醇或异丙醇）
Ø 生长培养基（细胞类型特异性的）
Ø 防护手套和外套
Ø 台盼蓝
5, 为初始实验的实施作计划和准备
依据产品附带的分析证书上表明的细胞数为依据确定实验的实施。
6, 核对培养箱的标度。培养箱内应保持一定的湿度并设定为37℃，5%CO2和95%空气。
相关英文信息如下：
-------引自Clonetics® Endothelial Cell Systems (Instructions for Use)
Unpacking and Storage Instructions
4. BulletKit® Instructions: Upon arrival, store Basal Medium at 4-8°C and SingleQuots® at -20°C in a freezer that is not self-defrosting. If thawed upon arrival, growth factors can be stored at 4°C and added to basal medium within 72 hours of receipt. After SingleQuots® are added to basal medium, use within one month. Do not re-freeze.
5. ReagentPack™ Subculture Reagents are sterile-filtered and then stored at -20°C until shipment. Subculture reagents may thaw during transport. They may be refrozen once. If you plan to use within 3 days, store at 4°C. Trypsin/EDTA Solution has a limited shelf life or activation at 4°C. If, upon arrival, Trypsin/EDTA is thawed, immediately aliquot and refreeze at –20°C. We recommend that the HEPES-BSS and the Trypsin Neutralizing Solution be stored at 4°C for no more than one month. Note: To keep Trypsin/EDTA fresh and active after thawing, you may aliquot it into sterile centrifuge tubes and re-freeze at -20°C.
Preparation of Medium（Perform the following steps in a sterile field. ）
For EGM® Complete, do the following:
1. Decontaminate the vial of BBE and medium bottle with ethanol or isopropanol.
2. Add the entire contents of the vial (approximately 2 ml) to the media with a pipette. Rinse the BBE vial with medium and pipette the contents back into the 500 ml bottle.
3. Replace the cap and swirl the medium gently a few times to mix.
4. Record the date the BBE was added on the medium label.
For a BulletKit®, perform the following steps:
1. Decontaminate the external surfaces of all supplement vials and the medium bottle with ethanol or isopropanol.
2. Aseptically open each supplement vial and add the entire amount to the basal medium with a pipette.
3. Rinse each cryovial with the medium. It may not be possible to recover the entire volume listed for each cryovial. Small losses, even up to 10%, should not affect the cell growth characteristics of the supplemented medium.
4. Transfer the label provided with each kit to the basal medium bottle being supplemented. Use it to record the date and amount of each supplement added. We recommend that you place the completed label over the basal medium label (Avoid covering the basal medium lot # and expiration date) to avoid confusion or possible double supplementation.
5. Record the new expiration date on the label based on the shelf life.
Note: If there is concern that sterility was compromised during the supplementation process, the entire newly prepared growth medium may be refiltered with a 0.2 μm filter to assure sterility. Routine refiltration is not recommended.
LONZA（原Cambrex、Biowhittaker）公司简介：
美国Cambrex成立于1981年，是全球人类健康与生物科学产品最主要的供应商，同时还是饲料添加剂的生产商和动物健康/农业市场的媒介以及优质化学试剂的制造商。主要细胞生物学产品、分子生物学产品、内毒素检测试剂等。自2007年2月起，Cambrex Bioproducts作为瑞士LONZA公司旗下，保留原有的科研队伍及专业人员，将以同样的产品品质、同样的服务质量继续服务于广大用户！详细产品信息如下：
Endotoxin Detection：内毒素检测产品 Endpoint Fluorescent Assay（PyroGene重组因子C分析） Gel Clot LAL Assays （胶凝法） Kinetic Turbidimetric LAL Assay （动力学浊度法） Endpoint Chromogenic LAL Assay（显色终点分析法） Kinetic Chromogenic LAL Assay（动力学显色法） Instrumentation & Software （设备、软件） Accessory Products（LAL附属产品） Research Products：科研产品
Cell Culture（细胞培养） Cell Analysis Stains（细胞污染分析） BioWhittaker® Classical Media（百威泰克基础培养基） BioWhittaker® Specialty & Serum-free Media（百威泰克特殊&无血清培养基） BioWhittaker® Cell Culture Reagents（百威泰克细胞培养试剂） BioAssays：生物鉴定 Mycoplasma Detection & Removal（支原体检测及祛除） Cell Health / Cell Function Assays（细胞活性、功能检测） Luminescent Assay Accessories High Throughput Screening Assays G-Protein Coupled Receptors and G-Protein Receptor Expressing Cell Lines Electrophoresis and Gene Expression：电泳和基因表达 Nucleic Acid Electrophoresis（核酸电泳） Protein Electrophoresis（蛋白电泳） Sequencing & Mutation Detection Products（测序&突变检测产品） 1.Clonetics原代细胞及培养基系统 （点击标题进入） |
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