LONZA 龙沙  细胞培养基

1, 治疗级无血清间质干细胞培养基

2, X-VIVO 限定化学成分无血清造血细胞培养基

3, ProCHO4 无蛋白CHO培养基

4, UltraDOMA无血清杂交瘤细胞培养基

5, UltraCHO无血清CHO细胞培养基

6, UltraCULTURE 无血清培养基

7, UltraDOMA-PF无蛋白杂交瘤细胞培养基

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LONZA 龙沙 细胞 培养基

 

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目的  从LCM获取的上皮细胞中发现大肠癌各病变阶段的miRNA特异性表达。验证大肠癌和癌前病变中的候选miRNA肿瘤标记物。
方法  运用优化的LCM组织处理方法从225例正常肠上皮、癌前病变和浸润癌手术切除冰冻组织中获取纯净的上皮细胞。用Agilent芯片技术对上述标本进行全基因组miRNA表达分析。未配对t检验和方差分析对miRNA芯片数据进行显著性差异分析。聚类分析进行miRNA基因表达差异的分类。用三种不同统计方法进行预测性分析。运用荧光实时定量RT-PCR进一步验证14个候选的miRNA肿瘤标记物在185例手术切除和肠镜活检石蜡标本中的表达。未配对t检验对miRNA在大肠癌和癌前病变中的表达进行显著性差异分析。受试者工作特征曲线(ROC)来评估候选miRNA肿瘤标记物的诊断价值。多元相关分析评估多个候选miRNA肿瘤标记物协同的诊断价值。
结果  在大肠粘膜上皮转化和演进过程中，存在两个水平分类组的miRNA：第一水平分类组可以预测非肿瘤和肿瘤；第二水平分类组可以预测腺瘤和腺癌。进一步验证发现，其中7个miRNA能在手术切除的石蜡组织中区分腺瘤与腺癌及高级别上皮内瘤变与早期肠癌。miRNA-92a与miRNA-375组合鉴别高级别上皮内瘤变和早期肠癌的敏感性为95%，特异性为88%。除此之外, 这7个miRNA还能在肠镜活检组织中鉴别高级别上皮内瘤变和大肠浸润癌，结果与术后病理诊断一致。其中miR-92a具有最高敏感性达93%；miR-7具有最高特异性达94%。
结论  miRNA表达与大肠癌肿瘤病理分期有显著的相关性。miRNA可以准确预测肿瘤与非肿瘤及进一步区分腺瘤与腺癌组织。7个miRNA肿瘤标记物能鉴别腺瘤和腺癌及高级别上皮内瘤变和早期大肠浸润癌（Dukes’ A）；还能在肠镜活检组织中鉴别高级别上皮内瘤变和大肠浸润癌并与术后病理诊断一致。

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