无血清造血细胞培养基http://www.bitebo.com/a/gb2312/info/2013/0413/5029.html
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本人之前总结的，Hela细胞传代步骤。零经验的新手们看看参考参考吧，老手们也多提些意见，以利改进。
Hela细胞确实比较好养，出点小差错也不会死，确实是新手开始练习培养细胞的比较好的选择。
废话不多讲，进入正题：
1、75%乙醇擦手，取离心管一个，打开超净台（照明、风机），把离心管置于架子上。然后用75%乙醇擦一下台面，点燃酒精灯。
2、取尖吸管、吸量管各一支，套好吸球，放置在专用的架上。
3、从冰箱中取出胰酶、PBS（或者versene）、培养基。可以把胰酶和PBS（versene）的瓶盖打开或者拧松。
4、取待传代的细胞
5、用尖吸管弃去旧的培养基，吸量管加入PBS（versene），然后将PBS（versene）瓶收起来。
6、用尖吸管洗一下细胞，然后将PBS（versene）弃掉；用吸量管吸取适量胰酶加入。弃掉吸量管。
7、将细胞放入37度孵箱。将胰酶和PBS（versene）瓶放入4度。
8、取一支吸量管，吸取适量培养基加入离心管。
9、取细胞，镜下观察消化情况。消化程度合适之后，用尖吸管弃去胰酶，取离心管中的培养基加入细胞，吹打，至所有细胞从培养皿底部脱落下来，然后吸取至离心管中，800 rpm离心5分钟。
10、吸量管吸取适量培养基加入新的培养皿中。将培养基收至4度保存。弃掉吸量管。
11、细胞离心毕，尖吸管弃去上清，吸取培养皿中培养基适量，加入离心管，将细胞重悬、吹匀。
12、细胞悬液加入新的培养皿中。镜下观察，摇匀，放入37度孵育。收超净台。
以上是本人传代Hela细胞的步骤。总计使用1根尖吸管、2根吸量管，还是比较节省的。其中一些细节，例如液体加入的具体量、细胞传代的比例，大家按情况，没有定值。
另外，versene对细胞有毒性，且不能被血清中和，必须离心去除。如果用PBS洗细胞，可不用离心。
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