FastDNA SPIN Kit for Soil中文说明书
简介
FastDNA® SPIN Kit for Soil的目的是从土壤样品中提取基因组DNA 供PCR使用在不到30分钟内。快速DNA提取方法排除使用有害的有机溶剂，如苯酚和氯仿。该工具包可在土壤社区从所有的细菌，真菌，植物和动物的基因组DNA提取。
该试剂盒包括三个部分：
1。裂解
Lysing Matrix E tubes中含有的陶瓷和硅粒子，旨在有效地溶解所有不同来源的微生物，包括真细菌孢子和芽孢，革兰氏阳性菌，酵母菌，藻类，线虫和真菌。
2。均质化试剂
MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer都经过精心挑选和准备，使完整的样本同质化和蛋白增溶。试剂能够以最小的RNA污染提取基因组DNA。
3。 DNA纯化和洗脱试剂
GENECLEAN ?过程是他们用来纯化基因组DNA。程序纯化DNA用专门的硅胶基质的同时消除污染物，抑制并发反应。
* Binding Matrix悬浮
* SEWS-M（盐乙醇洗，用前加100ml乙醇）
* DES（DNA洗脱液超纯水）
试验方案
样品处理：
1。添加500毫克的土壤到Lysing Matrix E Tube。
由于FastPrep ?仪器的移动，在管内看到大量的聚集。相同Lysing Matrix不应超过管的体积的7 / 8。留在管的空间，也提高了更好的同质化的机会。 [见注1] 裂解：
加入978μl Sodium Phosphate Buffer 和122μl MT Buffer。 [见注1]
2。 在FastPrep ?仪器中混匀40秒的速度6.0。
3。14000 XG离心Lysing Matrix E Tubes 5-10分钟。[见注2]
4。上清转移到一个2ml干净的管。加入250μlPPS试剂和混合，用手摇动管的10次。 5。 14000 XG离心5分钟沉淀沉淀。上清转移到一个干净的15毫升管。 上清液加入1ml Binding Matrix Suspension。 （Binding Matrix在用前重悬均匀）
4。上清转移到一个2ml干净的管。加入250μlPPS试剂和混合，用手摇动管的10次。
5。 14000 XG离心5分钟沉淀沉淀。上清转移到一个干净的15毫升管。 上清液加入1ml Binding Matrix Suspension。 （Binding Matrix在用前重悬均匀）
6。放在一个旋转器或手工反转2分钟，让DNA结合基质。将管放架上静置3分钟，让硅胶基质沉淀。
7。小心去除500μL上清，避免碰到沉淀的Binding Matrix。弃上清。重悬Binding
TMMatrix在剩余的液体中。约600μl的混合物转移到SPIN Filter，14000 XG离
心1分钟。倒空Catch Tube，并把剩下的上清加到SPINTM Filter中离心过滤。
8。添加500μL SEWS-M 到SPINTM Filter，离心1分钟，在14000 XG。倒出流过液并把SPINTM Filter放回Catch Tube。14000 XG离心2分钟，在清干SPINTM Filter中的剩余SEWS-M
9。移动SPINTM Filter到新的Catch Tube，室温下风干5分钟。 10。加入50-100μL DES轻轻的重悬，轻轻搅动滤膜用枪头或涡流/手指轻弹，
9。移动SPINTM Filter到新的Catch Tube，室温下风干5分钟。
10。加入50-100μL DES轻轻的重悬，轻轻搅动滤膜用枪头或涡流/手指轻弹，
重悬为高效的DNA洗脱二氧化硅矩阵。在14000 XG离心1分钟，转移洗脱的DNA到Catch Tube。 DNA是目前应用就绪。
注释
请阅读在进行任何FastPrep® DNA提取 之前 1。注1
重要：留下约0.25cc的空气空间。如果留下太少的空气空间，可能导致样品的损失，由于管故障或变形。样品的损失是由温升FastPrep ?运行期间使压力增加。在管内预留0.25cc空气空间，足够防止在例行FastPrep ?运行中样品损失。 2。注2
扩展到15分钟的旋转，可增强消除过多的碎片从大量的样品或从复杂的细胞壁的细胞。 注意：请确认管重量平衡和管的侧面和底部不会刮檫到你的离心壁，因为这将导致样品的快速流失的重量和平衡。
扩展到15分钟的旋转，可增强消除过多的碎片从大量的样品或从复杂的细胞壁的细胞。
注意：请确认管重量平衡和管的侧面和底部不会刮檫到你的离心壁，因为这将导致样品的快速流失的重量和平衡。
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