生物知识

原代细胞培养中的6个常见错误

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2016-10-20 22:39  浏览次数:
购买进口仪器、试剂和耗材——就在始于1994年的毕特博生物 www.bitebo.com

康宁/Corning® 淋巴细胞无血清培养基

 

康宁/Corning CellGro® 澳洲来源胎牛血清

 

 

lonza 无血清培养基

 

当培养原代细胞时,重要的是要记住,他们不是细胞系,不能同等对待。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误,以及如何纠正这些错误。供大家参考。

 

错误1:一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间

     纠正1:原代细胞对解冻过程非常敏感,因此将小瓶置于37℃水浴中,保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶,并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪,以便可以立即用于接种细胞,并置于培养箱中。

 

错误2:解冻match小瓶后直接离心原代细胞

     纠正2:我们不建议在解冻后离心细胞,因为离心程序比少量的DMSO残留更有害。记住,在恢复原代细胞后的第二天更换培养基以去除任何残留的DMSO。

 

错误3:允许原代细胞变得过于融合

    纠正3:当生长至100%汇合时,原代细胞可以变得衰老。记住,原代细胞不是100%纯,因此重要的是尽量减少污染细胞的生长。我们建议在细胞达到90-95%融合时,对原代细胞进行传代培养。


错误4:传代原代细胞时过度胰蛋白酶消化

     纠正4:当细胞传代时,使用低浓度的胰蛋白酶并在显微镜下密切监测细胞。此外,记得在胰蛋白酶消化后完全中和细胞中的胰酶,因为任何活性的胰蛋白酶都将损伤细胞。

 

错误5:原代细胞可以很容易地重新冻存

     纠正5:通常我们不推荐重新冻存原代细胞,因为这可以促进细胞衰老和/或导致功能变化。原代细胞非常敏感,重新冻结可能导致细胞死亡或损伤。

 

错误6:原代细胞可以无限的增殖

 

     纠正6:与细胞系不同,原代细胞具有有限的扩增能力。我们建议尽早使用原代细胞进行实验以防止遗传漂移。此外,如果你正在使用一个增值困难的细胞类型,你应该密切监测细胞形态,因为少量混杂的细胞(如成纤维细胞)可能随着时间的推移,大量生长从而成为主要细胞。

 

 

康宁/Corning® 淋巴细胞无血清培养基

 

康宁/Corning CellGro® 澳洲来源胎牛血清

 

 

lonza 无血清培养基

购买进口仪器、试剂和耗材——就在始于1994年的毕特博生物 www.bitebo.com

所有试剂均用于科研      北京毕特博生物技术有限责任公司 版权所有
服务热线:010-82015225/400-833-9299 | 传真:010-62015131 | E-mail:info@bitebo.com
京ICP备0528556号   京公网安备11010802008747   Skypedhfjcn