生物知识

内皮细胞培养

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2017-02-26 13:01  浏览次数:
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 1.取产后的新鲜脐带。如不立即培养可以保存于4℃中,但不宜超过12小时。无菌剪取长10~15厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管,亦可用于培养。


2.先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的静脉中,洗除残血,注入口处宜用线绳结扎,以防液体返流。 

3.用血管钳夹紧脐带一端,从另端向脐静脉中徐徐注入最终浓度为0.1%的胶原,待末端出现液体后结扎之,令充满血管,注入口亦应结扎,以防液体返流,消化3~10分钟。 

4.吸出含有内皮细胞的消化液,注入离心管中,为获取更多细胞,可再注入温PBS冲洗2~3次彻底清除干净残余细胞,一并注入离心管中离心。

5.吸除上清,加1640培养液,制成细胞悬液,接种入瓶皿中培养,顺利时2~3天内细胞即可长成单层。

 

 

EGM-2培养基-LONZA细胞培养基

 

LONZA内皮细胞、支气管上皮细胞生长培养基

 

 

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