生物知识

细胞为什么容易污染

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2019-06-02 16:49  浏览次数:
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 不出意外,我的细胞又污染了。呃,确切地说,已经是我第四次污染细胞了(总共五次),这是第六次细胞培养。希望这次能顺利长好细胞!

 

 

 

实际上大概问题出在下面几点:

 

1)穿戴一时爽,细胞白培养

  

 

进细胞房不换鞋,不戴口罩,不戴手套,虽然感觉挺爽呼吸畅快,但其实是细胞房的大忌讳!有更严格的细胞房连帽子都要戴上。为什么呢?换鞋就不说了,你应该也知道有真菌吧。但你根本不能保证你口腔支原体是不是会污染细胞,每当你哈一口气给细胞送温暖的时候,细胞就……呵呵了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的细菌真菌,要不你试试看拿火燎一下你的手,焦了才算灭菌。

 

2)紫外和酒精,乱用也不灵

 

 紫外和酒精能灭菌……吗?没错,能灭菌,但是紫外和酒精最多只能灭细菌,对真菌伤害很小。你不戴手套,可劲用喷壶喷手是没有什么卵用的。超净台为什么尽量要用酒精棉球而不是用酒精喷壶呢?因为用酒精棉球的话,可以在灭菌的同时把菌体从手上撸下去。而喷壶只能短暂灭菌而已,所以要多用棉球,少用喷壶。

 

3)生物安全柜,别超三八线 

 

 生物安全柜的玻璃窗是有警戒线的,超过这个警戒线,生物安全柜的风帘就起不到太大作用,而且会引入室内空气中的真菌,比如你的臭鞋里的酵母啥的。还会让你给细胞送温暖的呼吸里,自动带上支原体。

 

4)拿瓶不拿盖,拿盖污染快

                                                                                                                      

 

 用细胞培养瓶来培养的时候,最最忌讳的是啥?是你拿瓶子的时候,手拿着有盖子的那一面?为啥,因为一般来说瓶盖开关是最容易接触到瓶口的,你手拿着培养瓶,那手的虎口夹缝里所含有的真菌很容易就接触到瓶盖上,一旦造成污染,就是很严重的。

 

5)门前堆得多,霉菌找到窝 

 

 生物安全柜里操作的时候,门前最忌讳堆一堆杂七杂八的东西,你看看你,枪头盒、血清、管子,培养皿、移液器、酒精喷壶、酒精灯,堆了一大堆。有的都堵住了你门前的出风口。一来你操作起来并不是井井有条,会导致动作幅度过大,扰乱气流。二来这些东西一旦挡住风口,也会扰乱生物安全柜的气流,气流变化会导致外部不洁净的空气流入,也同样会导致生物安全柜的洁净作用失效。这必须要注意!

 

6)清洁水浴锅,否则杂菌多

 

 

 水浴锅是比较容易忽视的,你说你复苏细胞的时候,37℃,对细菌真菌来说这就是温床啊。复苏完,湿漉漉的冻存管,任你再怎么喷酒精也并没有什么意义了。那要怎么办,水浴锅一来是定期清洁,二来是加一些抑菌剂。别别别,不是让你往里面加双抗!水浴锅里要加2%的硫酸铜,但这个是比较容易腐蚀水浴锅的,所以定期也要更换清洁。

 

7)水盘要污染,一箱全玩完

 

 

 刚才说了水浴锅了,那接下去讲讲另一个坐拥37℃温床的水环境,也就是培养箱的水盘。有几次我都看到水盘里飘着特别大的一块块霉斑。这孢子,是你不敢想象的。一污染就一箱子全报废了,培养箱要定期用0.1%的新洁尔灭或者84清洗(交替使用,防止微生物耐药)。水盘也一样,水盘中加入饱和的磷酸氢二钠可以有效预防细菌真菌,但是需要定期加入去离子水防止析出。

 

8)灭菌灭不好,污染随时找

                                                                                                                        

 

细胞房所使用的枪头,必须要经过湿热灭菌,但你看你,湿热灭菌的枪头都没用报纸包好,不包好也就算了,灭完菌还不烤干!用报纸包裹好枪头,是因为灭菌锅一般在细胞房外面,所以要保证内部枪头盒结晶。烤干是为了防止内部有水分,当你开启枪头盒后,有水的地方更容易被霉菌的孢子所接触附着,也就更容易污染。所以这个也必须要注意!

 

9)激情移液器,污染洒满地

 

 

 

 

你用移液器的时候,吸液这么猛力果断,必然会把培养基或者细胞沾到移液器的口上。培养基这种东西,就是微生物的温床啊。不弄干净,下次再这么激情地用移液器,必然要污染,这个必须每次使用后,用75%的乙醇,或者5%的硫酸铜,或者0.1%的新洁尔灭来擦一下的。这样可以防止一些污染。

 

好了,说了这么多,这些就是你在操作的过程中,时刻需要注意的事情,养细胞不难,也不易。要不污染,就全要靠你时时刻刻把“无菌操作”这四个字记在脑海里。好了,今天就策这么多了,祝你们心明眼亮。

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