| 小鼠活体成像实验主要实验项目服务 |
| 序号 |
服务项目 |
具体描述 |
单价(元) |
实验周期 |
备注 |
| 1 |
Luciferase标记的稳转细胞株构建 |
先将要使用的肿瘤细胞用荧光素酶基因标记，抗性可选puromycin和blasticidin两种 |
3500 |
2-3周 |
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| 2 |
过表达某个基因慢病毒载体构建 |
构建进带有与步骤1中不同抗性筛选的载体，wb检测基因表达情况 |
1500以上 |
1-4周 |
价格和试验周期需要由基因大小来决定 |
| 3 |
敲减某个基因慢病毒载体构建 |
构建进带有与步骤1中不同抗性筛选的载体，qPCR检测基因敲减情况，一般选做3-4个靶点 |
2800 |
1-2周 |
确保至少一条shRNA敲减效率达到70%以上 |
| 4 |
过表达或敲减慢病毒包装 |
HEK293T中共转目的基因质粒和病毒包装质粒(psPAX2/pMD2.G),48/72小时后收取病毒上清 |
2000 |
1周 |
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| 5 |
过表达或敲减慢病毒感染肿瘤细胞株 |
病毒上清与polybrene混合，感染肿瘤细胞48-72小时 |
1000 |
2-4天 |
用第1步骤中的标记Luciferase细胞进行该步感染实验 |
| 6 |
稳转细胞株筛选 |
适量浓度的puromycin或blasticidin筛选4-6天，存活的细胞继续培养扩增 |
3000 |
6-10天 |
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| 7 |
稳转细胞株结果验证 |
WB或qPCR验证过表达与敲减情况，同时验证荧光素酶活性 |
500 |
2-3天 |
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| 8 |
裸鼠购买 |
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200元/只 |
1周 |
一般每组6-10只 |
| 9 |
裸鼠饲养 |
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10元/只/天 |
4-6周 |
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| 10 |
肿瘤细胞尾静脉注射 |
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80元/只 |
1天 |
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| 11 |
肿瘤细胞原位注射 |
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50-150元/只 |
1天 |
价格根据原位操作难度来定 |
| 12 |
活体成像检测 |
裸鼠麻醉，底物荧光素酶注射，仪器检测荧光强度 |
80元/只/次 |
7天/次 |
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| 13 |
结果分析 |
荧光强度分析比较 |
300元 |
1周 |
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| 14 |
裸鼠解剖，组织保存 |
取出肺，淋巴结，肝脏等可能会有转移的组织，福尔马林及液氮保存 |
30元/只 |
1天 |
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总计（元）
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10-14周 |
/ |
| 说明：2，3步骤按照实验具体情况可选择其一来做，后续如果需要做IHC或H&E，另外收费，其它条件按照客户特殊实验要求来协商定价 |
北京毕特博生物技术有限责任公司
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