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重组腺相关病毒生产的理想之选
TransIT®-VirusGEN™ 在悬浮和粘附 AAV 细胞培养方面优于竞争对手试剂
用以下试剂用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper(1:1:1 比例,1.5μg/ ml,安捷伦科技)转染在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 或粘附的 293T/17 细胞 (B) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞:TransIT®-VirusGEN™(2:1,体积重量比),Lipofectamine®2000(3:1,Thermo Fisher),Lipofectamine®3000(3:3:1,Thermo Fisher)或 25 kDa PEI(4:1,Polysciences)。使用收获的病毒转导 HT1080 细胞,并使用 guava easyCyte™ 5HT 流式细胞仪在转导后 48 小时测量 GFP 表达。从具有少于 20%GFP 阳性细胞的病毒稀释液测量功能滴度。误差条表示一式三份孔的标准偏差。
TransIT®-VirusGEN™ 在悬浮和粘附慢病毒细胞培养方面优于竞争对手试剂
使用 pLKO 转染在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 或粘附的 293T/17 细胞 (B) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞。1-puro-CMV-TurboGFP™ 转移载体和由 MISSION®(1:1比例,1μg/ ml)驱动的慢病毒包装混合物,含有以下试剂:TransIT®-VirusGEN™(3:1,体积重量比),Lipofectamine® 2000(2:1 (A) 或 3:1 (B),Thermo Fisher),Lipofectamine® 3000(2:2:1 (A) 或 3:3:1 (B),Thermo Fisher)或 25 kDa PEI(4:1,Polysciences)。收获上清液,过滤 (0.45 µm),并使用 293T/17 细胞滴定。在 8 μg/ml TransduceIT™ 存在下进行慢病毒转导,并使用 Guava easyCyte™ 5HT 流式细胞仪在转导后 72 小时测量 GFP 表达。从具有少于 20%GFP 阳性细胞的病毒稀释液测量功能滴度。误差条表示一式三份孔的标准偏差。
TransIT®-VirusGEN™ 实现广泛的可扩展性
使用 TransIT®-VirusGEN™(2:1 试剂与 DNA 的比例(体积重量比),Mirus) ,使用指定的体积和培养容器,用 pAAV-hrGFP,pAAV-RC 和 pAAV-Helper(1:1:1 比例,1.5 总 μg/ ml,安捷伦科技)转染在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 或粘附的 293T/17 细胞 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞。将收获的病毒用于转导 HT1080 细胞,并通过流式细胞术测量 48 小时的 GFP 表达。从具有少于 20%GFP 阳性细胞的病毒稀释液测量功能滴度。误差条表示一式三份孔、烧瓶或培养皿的标准偏差。
特性
· 可靠 – 一致的高病毒滴度生产
· 可扩展 – 在各种规模上高效表达
· 很灵活 – 处理不同的病毒和细胞培养系统
描述
· TransIT®-VirusGEN™ 转染试剂旨在增强包装和转移载体向贴壁和悬浮 HEK 293T 细胞类型的传递,并增加重组腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒生产。
订单信息
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北京毕特博生物技术有限责任公司
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