Hepa-IC XG003
检测肝细胞癌(HCC)中鳞状细胞癌抗原(SCCA)变异体免疫复合物的ELISA试剂盒
肝细胞癌 (HCC) 是当今世界上最为常见的恶性肿瘤之一, 其发生率在各种癌症中位居第四. 它的预后非常差, 在诊断后的五年中存活率还不到5％.由于缺乏足够的高特异性和高敏感性的生物学标志物来清楚区分肝细胞癌和其它受损肝脏，肝细胞癌的早期诊断还相当困难. 甲胎蛋白(AFP)是现在最普遍用于诊断肝细胞癌的血清学标志物,在大多数肝癌患者的血清中AFP水平有显著升高(30-60％),但特异性较低(70-80%). 鳞状细胞癌抗原 (SCCA)变异体是在肝脏外科手术切除的肝细胞肿瘤中发现的一种新型标志物,利用其抗体(Hepa-Ab)(1)的免疫组化技术(FIG.1),在正常的肝脏中检测不到这种标志物,而在HCC患者的血清中，SCCA变异体则相对于健康人群以70%的敏感性和100％的特异性以游离免疫复合物(SCCA-IC)的形式被检测出来.Hepa-IC是专为检测肝细胞癌患者血清中的SCCA变异体而设计的一种敏感性和特异性均较高的试剂盒(2, 3).
在Hepa-IC的检测中，以健康人肝脏作为阴性对照(<120AU/ML)(其表达的SCCA-IC浓度作为标准参照),大多数(70％)肝细胞癌样本呈阳性反应 (mean±SD=2568.5±6796.3AU/ML)(FIG.2)，在26％的肝硬化患者中检测到SCCA-IC，但其水平较低(mean ± SD =147.5±348.3AU/ML),而在慢性丙肝患者的样方中,有18％的病人检测到该种免疫复合物，但其水平非常低(mean± SD =39.5±89.7AU/ML).在AFP检测中未发现此种相关性:迄今统计的42%的HCC患者中AFP水平有显著升高(>20ng/ml),在分别用20ng/ml和100ng/ml的AFP作为排除阈值时,分别有96%或80％的HCC患者对一种标志物呈阳性反应.FIG.3比较了三种肝病患者和正常人对照组的SCCA-IC和AFP水平检测的灵敏性、特异性、阳性预期值(PPV)及阴性预期值(NPV).
FIG.1:免疫组化技术显示用抗SCCA变异体抗体着色后肝细胞癌(HCC)结节的外观
FIG.2:利用Hepa-IC ELISA试剂盒检测SCCA变异体和AFP分别在肝细胞癌HCC(n=60)、肝硬化CR(CR,n=60)、慢性肝炎CH(CH,n=60) 患者以及正常对照组中的血清水平
FIG.3:显示在患有肝脏疾病的患者和正常对照组中利用SCCA-IC和AFP检测在敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值的对照.
规格
成份:
XG003-PL 多条带化验板: 96孔板上用亲和纯化的兔抗SCCA抗体预包被
XG003-IC SCCA-IC标准液：纯化的人SCCA-IC标准液
XG003-EA第二抗体：酶联二抗
XG003-CH Chromogen:显色剂
G003-SB酶的底物溶液
XG003-DB稀释缓冲液
XG003-WB清洗缓冲液
参考文献
1、Pontisso P et al. (2004), Br. J. Cancer, 90(4):833-837
2、Beneduce L et al. (2004), J. Hepatol, 40 (suppl.1):77
3、Beneduce L et al. (2004), Digestive and Liver Disease, 36:A2-A3
所需仪器:
微孔板清洗装置和酶标仪
简要使用程序
标准曲线和标本:每孔加100μl的XG003-IC标准液(从250AU/ml连续稀释直浓度为15.6AU/ml)及稀释8倍的样品溶液，以每孔加100μl的XG003-DB稀释液作为空白。在室温下孵育1小时，用XG003-WB清洗缓冲液冲洗6次。
第二抗体:每孔加100 μl的XG003-EA酶联抗体在室温下孵育1小时，用XG003-WB洗液漂洗6次。
ABTS 酶作用底物溶液:每孔加200μl新鲜配制好的ABTS底物溶液，置暗处使酶和底物反应显色，并用ELISA酶标仪检测每孔在405nm处的OD值。
FIG.4:底物孵育1小时后SCCA-IC标准曲线的线性范围
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